酶聯(lián)免疫試劑盒的使用方法如下：
 

　　1、確定檢測所需的已包被抗體的酶標(biāo)板孔數(shù)目。
 

　　2、將倍比稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品各0.1ml依次加入一排7孔中，1孔只加樣品稀釋液的作為對照。處理后的標(biāo)本按100ul每孔加入。
 

　　3、酶標(biāo)板加上蓋，37℃反應(yīng)90分鐘。
 

　　4、反應(yīng)后用自動洗板機(jī)吸去酶標(biāo)板內(nèi)的液體；或甩去酶標(biāo)板內(nèi)液體，再對著吸水紙拍幾下。洗滌2次。
 

　　5、將準(zhǔn)備好的生物素抗體工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)60分鐘。
 

　　6、0.01MTBS或0.01MPBS洗滌3次，每次浸泡1分鐘左右。
 

　　7、將準(zhǔn)備好的ABC工作液按每孔0.1ml依次加入。37℃反應(yīng)30分鐘。
 

　　8、0.01MTBS或0.01MPBS洗滌5次，每次浸泡1-2分鐘左右。
 

　　9、按每孔0.1ml依次加入TMB顯色工作液，37℃避光反應(yīng)，反應(yīng)過程中，要經(jīng)常的觀察，當(dāng)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔差別不明顯時，即可加入TMB終止液0.1ml/孔。(顯色反應(yīng)Z長不要超過30分鐘)。
 

　　10、用酶標(biāo)儀在450nm測定O.D.值。
 

　　11、根據(jù)樣品的吸光值在坐標(biāo)上找出對應(yīng)的濃度。用戶也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。應(yīng)記住由于樣品稀釋了N倍，其實際濃度應(yīng)該×N。