做優(yōu)化ELISA試劑盒加樣應留心哪些步驟
ELISA試劑盒加樣的優(yōu)化:在這一進程中,一般情況下有三次加樣,它們分別是加標本,加酶物,加底物。凍住血清融解后,蛋白質(zhì)部分濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,防止氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上劇烈振動。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只需待血清天然凝集、縮短后即可獲得。也可在板孔中參與稀釋液,再在其參與血清標本,然后在微型顫動器上顫動1分鐘以確?;旌?。一般說來,在5天內(nèi)測定的血清標本可放置于4℃,跨過一星期測定的需低溫冰存。
ELISA試劑盒常見液體樣本處理方法
1、血清:用無菌管搜集,室溫血液自然凝固10-20分鐘,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),細心搜集上清,保存過程中如出現(xiàn)堆積,應再次離心。
2、尿液:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。細心搜集上清,保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
3、血漿:應根據(jù)標本的要求挑選EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),細心搜集上清,保存過程中如有堆積構成,應該再次離心。
4、胸腹水:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),細心搜集上清,保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
5、腦脊液:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),細心搜集上清,保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
6、唾液:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),細心搜集上清,保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
7、細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管搜集。2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),細心搜集上清,保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
8、牛奶:用無菌管搜集,2-8℃條件離心20分鐘左右(2000-3000轉/分),細心搜集上清,保存過程中如有堆積構成,應再次離心。
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