ELISA試劑盒方法設計的原理根據(jù)是什么?
2019-03-18
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ELISA試劑盒在的實踐運用中,通過不同的規(guī)劃,詳細的方法進程可有多種。如雙抗體夾心法、間接法、競爭法、雙位點一步法、捕獲法測IgM抗體、運用親和素和生物素的ELISA。在今天的技術內容中,研域(上海)化學試劑有限公司為您詳解ELISA方法規(guī)劃的原理根據(jù)。
ELISA試劑盒以免疫學反應為根底,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化效果相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體-聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每參與一種試劑孵育后,可通過洗滌除去剩余的游離反應物,然后確保實驗效果的特異性與穩(wěn)定性。
運用雙抗體夾心法測定標本水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中順次參與,再與HRP符號的抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,通過*洗滌后加底物TMB顯色。
ELISA試劑盒TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的效果下轉化成zui終的。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線核算樣品的濃度。
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