ELISA試驗與完好大鼠ELISA試劑盒的聯(lián)系
ELISA試劑盒包括以下各組分:已包被抗原或抗體的固相載體(免疫吸附劑);酶符號的抗原或抗體(物);酶的底物;陰性對照品和陽性對照品(定性測定中),大鼠ELISA試劑盒參閱標(biāo)準(zhǔn)品和操控血清(定量測定中);酶聯(lián)物(物)及標(biāo)本的稀釋液;洗刷液;酶反響停止液。ELISA中有三個必要的試劑:免疫吸附劑、物和酶的底物等。
疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2~8℃)干燥的條件下通??杀4?個月以上??勺鱁LISA中載體的資料良多,zui常用的是聚苯乙烯。以含鐵的磁性微粒作為ELISA固相載體,反響后用磁鐵的招引進(jìn)行別離,洗刷利便,大鼠ELISA試劑盒通常均配以特殊儀器。為對比不一樣固相在某一ELISA測定中的好壞,可應(yīng)用如下的實驗:用別的免疫學(xué)測定方法選出一個典型的陽性標(biāo)本和陰性標(biāo)本,將它們進(jìn)行一系列稀釋后,在不一樣的固相載體上按預(yù)訂的ELISA操作過程進(jìn)行測定,然后對比成果。小試管還能夠當(dāng)作比色杯,zui終直接放入分光光度計中比色。直接包被的抗原經(jīng)固相抗體的親和層析作用,包被在固相上的抗原純度大大前進(jìn),因而含雜質(zhì)較多的抗原也可選用捕捉包被法,實驗的特異性、敏感性均由此得以改進(jìn),重復(fù)性亦佳。
大鼠ELISA試劑盒聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的機(jī)能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍留存原來的免疫學(xué)活性,加之它的價格低廉,所以被遍及選用。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是經(jīng)過物理吸附的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團(tuán)與固相載體外表的疏水基團(tuán)間的作用力。操控反響條件,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8擺布。一切單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應(yīng)小于10%。例如,在檢查抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,而遍及的固相載體通常不能直接與核酸。ELISA板的特點是能夠同時進(jìn)行很多標(biāo)本的檢查,并可在特制的比色計上靈敏讀出成果。換言之,包被等于抗原或抗體到固相載體外表的過程。在哪一種載體上陽性成果與陰性成果不同zui大,這種載體即是這一ELISA測定項目的zui合適的固相載體。
ELISA載體的外形主要有三種:微量滴定板、小珠和小試管。良好的ELISA板應(yīng)該是吸附機(jī)能好,空缺值低,孔底透明度高,各板之間、統(tǒng)一板各孔之間、統(tǒng)一板各孔之間機(jī)能附近。再者,球型小珠的外表弧度更有利于吸附的抗原決定簇或抗體位點的露出面處于*反響狀況,大鼠ELISA試劑盒因而珠式ELISA的反響通常更為靈敏。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強(qiáng)的吸附力,其聯(lián)結(jié)多發(fā)生在Fc段上,抗體點露出于外,因而抗體的包被通常均選用直接吸附法。